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什么是單分子技術單分子技術簡介 圖解:光鉗實驗設計示意圖:黑色線條的RNA分子,固定于兩顆奈米珠之間,奈米珠分別由微管及雷射固定。實驗過程移動雷射位置改變兩奈米珠間的距離,進而拉扯RNA的結(jié)構(gòu)。
單分子技術在實驗方法上可以分為兩大類:一種是對分子施加外力,像是光鉗、磁鉗和原子力顯微鏡。其中光鉗的做法,是利用磁珠分別修飾于待測分子之上,再以雷射光去移動兩磁珠間的位置,磁珠距離的改變,進而拉扯分子達到施力的效果;另一種是利用螢光標記待測分子使其發(fā)光成像,此種種類較多,包括共軛焦顯微鏡、全反射螢光顯微鏡和螢光共振能量轉(zhuǎn)移技術等等。
單分子技術目前已被廣泛應用在生命科學領域,像是在蛋白質(zhì)表現(xiàn)和分子間交互作用的相關研究,都可發(fā)現(xiàn)其身影。而依照應用的對象,單分子技術可以大致分為兩類:第一類是馬達蛋白的移動和行為表現(xiàn)。例如,核醣核酸聚合酶利用核苷酸生成核酸,解旋酶解開雙股DNA,細胞骨架的行為等等。第二類是觀察蛋白質(zhì)和核酸二三級結(jié)構(gòu)的摺疊情形。另外,單分子技術也可以結(jié)合傳統(tǒng)的分生技術,進一步得到更多的資訊。
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